免疫印迹技术-检查项目-大众养生网

热门搜索：
营养饮食 食物相克 食物热量

免疫印迹技术

基本信息

  • 专科分类： 生长发育检查
  • 检查分类： 生化检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　非空腹
  • 手术参考价： 120元
  • 科　室： 生长发育检查

免疫印迹技术检查简介

免疫印迹法是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测,具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。

免疫印迹技术检查过程

(一)蛋白质样品获得：细菌诱导表达后，可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞，真核细胞加匀浆缓冲液，机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃，13,000g离心15min。取上清液作为样品。

(二)电泳：制备电泳凝胶，进行SDS-PAGE。

(三)转移：(半干式转移)

1、电泳结束后将胶条割至合适大小，用转膜缓冲液平衡，5min×3次。

2、膜处理：预先裁好与胶条同样大小的滤纸和NC膜，浸入转膜缓冲液中10min。

3、转膜：转膜装置从下至上依次按阳极碳板、24层滤纸、NC膜、凝胶、24层滤纸、阴极碳板的顺序放好，滤纸、凝胶、NC膜精确对齐，每一步去除气泡，上压500g重物，将碳板上多余的液体吸干。接通电源,恒流1mA/cm2，转移1.5hr。转移结束后，断开电源将膜取出,割取待测膜条做免疫印迹。将有蛋白标准的条带染色，放入膜染色液中50s后，在50%甲醇中多次脱色，至背景清晰，然后用双蒸水洗，风干夹于两层滤纸中保存，留与显色结果作对比。

(四)免疫反应：

1、用0.01MPBS洗膜，5min×3次。

2、加入包被液，平稳摇动，室温2hr。

3、弃包被液，用0.01MPBS洗膜，5min×3次。

4、加入一抗(按合适稀释比例用0.01MPBS稀释，液体必须覆盖膜的全部)，4℃放置12hr以上。阴性对照，以1%BSA取代一抗，其余步骤与实验组相同。

5、弃一抗和1%BSA，用0.01MPBS分别洗膜，5min×4次。

6、加入辣根过氧化物酶偶联的二抗(按合适稀释比例用0.01MPBS稀释)，平稳摇动，室温2hr。

7、弃二抗，用0.01MPBS洗膜，5min×4次。

8、加入显色液，避光显色至出现条带时放入双蒸水中终止反应。

相关医生

更多>

  • 李秀莲,主任医师
    李秀莲 主任医师
    未开通
    青海省妇女儿童医院 儿科

    擅长疾病： 新生儿疾病的诊断、治疗与护理。

  • 卢秀英,主任医师
    卢秀英 主任医师
    未开通
    青海省妇女儿童医院 急救科

    擅长疾病： 危重病的救治。

  • 席时华,主任医师
    席时华 主任医师
    未开通
    乌鲁木齐市友谊医院 眼底

    擅长疾病： 青光眼的早期诊断及难治性青光眼的治疗，眼底疾病及小儿弱视诊治

  • 李晶,主任医师
    李晶 主任医师
    未开通
    乌鲁木齐市友谊医院 眼底

    擅长疾病： 眼科常见病、多发病的诊断、治疗，特别是对准分子激光治疗近视、青光眼、泪道疾病及眼外伤的治疗积累了丰富的临床经验

相关医院

专家推荐

  • 李秀莲

    李秀莲 新生儿疾病的诊断、治疗与护理。

    擅长：主任医师

    著名中医肿瘤学家及中西医结合临床肿瘤学家，现为广州中医药大学第一附属医院副院长，医学博士、教授、博

  • 卢秀英

    卢秀英 危重病的救治。

    擅长：主任医师

    从事儿内、急救专业近四十年，具有丰富的危重症及疑难杂症抢救治疗经验。特别擅长各种休克、中毒、抽搐等

  • 席时华

    席时华 青光眼的早期诊断及难治性青光眼的治疗，眼底疾病及小儿弱视诊治

    擅长：主任医师

    从事眼科临床工作40余年，具有极丰富的临床经验及诊治疑难眼病的能力，尤其擅长青光眼的早期诊断及难治

  • 李晶

    李晶 眼科常见病、多发病的诊断、治疗，特别是对准分子激光治疗近视、青光眼、泪道疾病及眼外伤的治疗积累了丰富的临床经验

    擅长：主任医师

    李晶，女，1962年12月生，汉族，陕西人。1985年毕业于新疆医学院医疗系，学士学位。毕业后分配

  • 热西提

    热西提 内科心血管疾病的诊断与治疗

    擅长：主任医师

    1965年毕业于新疆医学院临床医疗学，擅长内科心血管疾病的诊断与治疗，曾获自治区优秀专家称号。全国

疾病科室

更多 >

推荐文章

查看更多>

推荐问答

问脑梗患者能否去饮酒
答

脑梗患者不宜饮酒。饮酒会刺激血管收缩，增加心脏负担，导致血压升高，从而增加脑梗复发的风险。酒精还会影响肝脏功能，降低肝脏对药物的代谢能力，影响脑梗患者的药物治疗效果。此外，酒精对神经系统有抑制作用，可能加重脑梗患者的神经功能障碍。因此，脑梗患者应严格戒酒，以降低疾病复发风险，促进康复。

问肋软骨炎有哪些典型的症状
答

肋软骨炎，也称为Tietze综合征，是一种影响肋骨与胸骨连接处软骨的炎症性疾病。其典型症状包括局部胸壁疼痛，尤其是在肋骨与胸骨连接处，疼痛可能随呼吸、咳嗽或活动而加剧。患者可能会在受影响的肋软骨区域触及到肿胀或硬化的软骨。此外，患者可能伴有局部压痛，但通常无全身症状，如发热或体重减轻。肋软骨炎的诊断主要依据病史和体格检查，有时需要影像学检查以排除其他可能的病因。

问髌韧带的损伤能自愈吗
答

髌韧带损伤是否能自愈取决于损伤的严重程度和个体差异。轻度损伤在适当的休息和保护下，可能通过身体自身的修复机制逐渐恢复。然而，中度或重度损伤可能需要物理治疗、运动康复甚至手术治疗来促进愈合。在任何情况下，都应避免过度使用受伤部位，以免加重损伤。建议在专业医疗人员的指导下进行治疗和康复，以确保最佳的恢复结果。

问腰闪了怎么快速的恢复
答

腰部扭伤后，应立即停止活动，避免进一步损伤。可以采取冷敷处理，以减轻局部肿胀和疼痛，通常在受伤后的24-48小时内进行。之后，可以转为热敷，以促进血液循环和肌肉放松。同时，保持适当的休息，避免重体力劳动和剧烈运动。在医生指导下，可以进行适度的腰部拉伸和加强锻炼，以增强腰部肌肉的力量和灵活性。此外，保持良好的姿势和正确的举重技巧也是预防再次受伤的关键。如症状持续不缓解，应及时就医，以便获得专业的治疗和指导。

问肺癌会遗传的吗
答

肺癌的发生与遗传因素存在一定关联，但并非直接遗传性疾病。部分研究表明，具有家族肺癌史的人群患肺癌的风险相对较高，这可能与遗传因素、共同的生活环境和生活习惯等因素有关。然而，并非所有肺癌患者都有家族史，环境因素和生活方式在肺癌的发生中也扮演着重要角色。因此，虽然遗传因素可能增加个体患肺癌的风险，但肺癌的发生是多因素共同作用的结果，遗传并非唯一决定因素。

问地包天矫正的方法是什么
答

地包天，即下颌前突，是一种常见的牙齿错位问题。矫正方法主要包括正畸治疗和外科手术。正畸治疗通常适用于青少年患者，通过佩戴牙套、牙箍等矫正装置，逐步调整牙齿和颌骨的位置，以达到矫正效果。对于成人患者或错位较为严重的患者，可能需要进行外科手术，如颌骨矫正手术，以改变颌骨的位置和形态。在治疗过程中，患者需定期复查，以监测矫正进展，并根据医生指导调整治疗方案。

查看更多>