PHA淋巴细胞转化试验

• 专科分类： 肿瘤科
• 检查分类： 免疫检查
• 适用性别： 男女均适用
• 是否空腹： 　非空腹
• 手术参考价： 45元
• 科　室： 肿瘤科

操作方法：

1.取无菌肝素抗凝血0.lml，加入1.8ml细胞培养液中，同时加入1000μg/m1PHA0.1m1，对照管不加PHA，将细胞置37℃、5%CO2培养3d，每天摇动1次。

2.培养结束时吸弃大部分上清液，加入8.5g/LNH4Cl4ml混匀，置37℃水浴10min。

3.2500r/min离心10min，弃上清液，沉淀加5ml固定液，室温作用5min。

4.2500r/min离心10min，弃上清液，留0.2ml沉淀细胞制片，迅速吹干。

5.吉姆萨染液染色10～20min，水洗，干燥。

6.油镜计数200个淋巴细胞中转化的细胞数，计算转化率。

结果判断：

1.淋巴母细胞的形态学标准细胞核的大小、核与胞浆的比例、胞浆染色性及核的构造与核仁的有无。

⑴成熟的小淋巴细胞：与未经培养的小淋巴细胞大小一样，为6～8μm，核染色致密，无核仁，核与胞浆比例大，胞浆染色为轻度嗜碱性。

⑵过渡型淋巴细胞：比小淋巴细胞大，约10～20μm，核染色致密，但出现核仁，此为与成熟小淋巴细胞鉴别要点。

⑶淋巴母细胞：细胞体积增大，约20～30μm，形态不整齐，常有小突出，核变大，核质染色疏松，有核仁1～2个，胞浆变宽，常出现胞浆空泡。

⑷其它细胞：如中性粒细胞在培养72h后，绝大部分衰变或死亡呈碎片。

2.淋巴细胞转化率的计算按上述分类检查推片头、体、尾三部分，计数200个淋巴细胞，算出百分率。转化的淋巴细胞包括淋巴母细胞和过渡型淋巴细胞，未转化的淋巴细胞指的是成熟的小淋巴细胞。在正常情况下，PHA诱导的淋巴细胞转化率为60～80%，如为50～60%则偏低，50%以下则为降低。

再根据结果得出正确的判断。