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血清谷丙转氨酶

基本信息

  • 专科分类： 消化
  • 检查分类： 肝功能检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手术参考价： 15元
  • 科　室： 消化

血清谷丙转氨酶检查简介

丙氨酸氨基转移酶(ALT)是通常所称谷丙转氨酶(CPT)，存在于各组织细胞，以肝脏含量最多，其次是心肌细胞内，血清中酶活性很低。当这些组织病变，细胞坏死或通透性增强时，细胞内酶释放入血，使血清中ALT活性增高。血清ALT测定主要用于肝脏病的诊断。

血清谷丙转氨酶检查过程

取材：血液

血清谷丙转氨酶的测定原理：

（1）比色法测定：ALT催化基质中的丙氨酸和α-酮戊二酸反应，生成谷氨酸和丙酮酸，后者与2，4-二硝基苯肼作用，生成苯腙，在碱性条件下显色。

（2）连续监测法：在ALT催化的反应中生成的丙酮酸，被LDH还原成乳酸，并使NADH氧化成NAD＋，在340nm波长下吸光度降低，NADH的氧化速率与ALT活力成正比。

试剂：

（1）比色法测定：

①0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）。

A液：称磷酸二氢钾13.6g，溶于水中，加水至1000ml，冰箱保存。

B液：称磷酸氢二钠（含两个结晶水）17.6g，溶于水中，并加水至1000ml，冰箱保存。

取A液80ml，B液420ml混合，置冰箱内保存即可。

②ALT基质液：精确称取DL-丙氨酸1.79g和α-酮戊二酸29.2mg，溶于50ml磷酸盐缓冲液中，用1mol/LNaOH溶液（约0.5ml）校正pH7.4，再加磷酸盐缓冲液至100ml，可稳定2周。加麝香草酚90mg，可延长使用时间。

③1mol/L2，4-二硝基苯肼（DNPH）溶液：称取DNPH19.8mg，溶于1000ml1mol/LHCl中，置室温保存。

④0.4mol/LNaOH溶液：溶解16.0gNaOH于水中，并加至1000ml，置带塞塑料瓶内，置室温保存。

⑤2mmol/L丙酮酸标准液：可购买或自配。准确称取22.0mg丙酮酸钠（AR），置于100ml容量瓶中，加0.05mol/L硫酸至刻度。

（2）连续监测法：

①基质液的成分和浓度（IFCC）：100mmol/LTris缓冲液（pH7.5），15mmol/Lα-酮戊二酸，500mmol/LL-丙氨酸，0.18mmol/LNADH，0.1mmol/L磷酸吡哆醛，1200U/L乳酸脱氢酶。

②市售试剂盒：按说明书用蒸馏水或稀释液溶解，用后置冰箱保存，一般可稳定4天。

操作方法：

（1）比色法测定：其基质液37℃预温，按表1操作。

混匀，置37%水浴20min，各管加0.4mol/LNaOH溶液5ml，混匀，置室温5min后，在505nm处用对照管调零点，读取各管吸光度，查标准曲线即得ALT活力单位。

（2）连续监测法：各实验室可根据本室的分析仪型号及操作说明书而定。主要参数：340nm波长，37℃，样本与试剂体积比为1∶10。

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