马破伤风免疫球蛋白皮试液的制作方法是：先从血清中提取出0.1毫升的破伤风抗毒素，再用混合的1%氯化钠溶液稀释到一毫升，就制成了皮试液。由于这种抗毒素是从马的血清当中提取出来的，所以被称为马破伤风免疫球蛋白皮试液。
由于抗毒素当中含有许多特异蛋白，有可能会与人体中的免疫系统发生严重的过敏反应，甚至会引起休克，所以注射前必须进行皮肤过敏性试验，也就是皮试。在专业的医生或者护士的操作下，将皮试液注入到患者的前臂手掌那一侧，然后进行30分钟的观察。如果在注射皮试液的部位没有出现红肿，就是阴性反应，患者没有过敏反应，可以直接注射马破伤风抗毒素。但是患者如果在注射部位出现了局部红肿、疼痛、瘙痒等情况，就有可能是发生了阳性反应，就必须更换为脱敏治疗注射。