流式细胞DNA分析

• 专科分类： 心血管
• 检查分类： 血液检查
• 适用性别： 男女均适用
• 是否空腹： 　非空腹
• 手术参考价： 600元
• 科　室： 心血管

流式细胞DNA分析：直接用可产生荧光的核酸染料(如碘化丙啶)对胸水中细胞进行染色，流式细胞仪分析胸水细胞的DNA含量、细胞周期分布和DNA倍体数.

流式细胞术常规检测时的样品制备:

(一)直接免疫荧光标记法

取一定量细胞(约1X106细胞/ml)，直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色，可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入)，孵育20～60分钟后，用PBS(pH7.2～7.4)洗1～2次，加入缓冲液重悬，上机检测。本方法操作简便，结果准确，易于分析，适用于同一细胞群多参数同时测定。虽然直标抗体试剂成本较高，但减少了间接标记法中较强的非特异荧光的干扰，因此更适用于临床标本的检测。

(二)间接免疫荧光标记法

取一定量的细胞悬液(约1X106细胞/ml)，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，再加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体-抗抗体复合物，以FCM检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。本方法费用较低，二抗应用广泛，多用于科研标本的检测。但由于二抗一般为多克隆抗体，特异性较差，非特异性荧光背景较强，易影响实验结果。所以标本制备时应加入阴性或阳性对照。另外，由于间标法步骤较多，增加了细胞的丢失，不适用测定细胞数较少的标本。