痰液分泌型IgA

痰液分泌型IgA注意事项

（1）抗原抗体的比例对浊度的影响：当抗原抗体比例相等时，形成的复合物和解离是相等的。当抗原含量过多时，形成的复合物小，而且倾向于再溶解，可逆反应大。当抗体含量过多时，形成的复合物体积大，且为不溶性，可逆反应小。因此，作为速率比浊，令其抗体过剩，有利于复合物的形成。

（2）抗血清的质量影响：作为免疫反应的抗血清要求效价高、特异性强、纯度高。作为比浊用的抗血清还应具备：

①抗血清的亲和力要大，故动物免疫时可采取小量，长期免疫的方法获得。

②动物的种类，以R型动物（包括羊、豚鼠、家兔等）制备的抗血清亲和力强，抗原抗体结合后不易解离。

③抗血清须严格处理，应无干扰离子，可采用高速离心或0.45μm超滤膜过滤以排除干扰。长期保存须放－20℃保存。

（3）抗原抗体反应的溶液。

①抗原抗体反应最适pH为6.5～8.5，超过此限度则不易形成复合物，甚至可被分解。

②离子强度可直接影响抗原抗体反应的结合，离子强度大复合物形成快，低则阻碍复合物的形成，应用PBS是较好的反应液。

（4）亲水剂的影响：亲水剂如PEG（聚乙二醇），Tween20，MES（玛啡代-2烷磺酸）等可促进沉淀反应的形成。缓冲液中引入一定的PEG对大分子复合物沉淀是十分重要的。

（5）标准曲线的应用：当试剂条件和室温条件不变时，曲线可相对用一段时间，但不能长期不变。应用质控血清校准，可保证测定值的准确、可靠。

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