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β-内酰胺酶

基本信息

  • 专科分类： 传染病检查
  • 检查分类： 生化检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　非空腹
  • 手术参考价： 45元
  • 科　室： 传染病检查

β-内酰胺酶检查简介

β-内酰胺酶是指能催化水解生物分子中β-内酰胺环中的的酰胺键的灭活酶。细菌产生β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制。β-内酰胺酶类抗生素包括青霉素类,头孢菌素类,非典型β-内酰胺类等,是品种最多,研究进展最快,临床应用最广泛的一大类药物。

β-内酰胺酶检查过程

β-内酰胺酶的检测

临床标本中分离金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌以及最近发现的肠球菌属少数菌株对青霉素、氨苄青霉素出现耐药。由于上述菌株产生β-内酰胺酶水解前述抗生素。检测该酶有下列方法：

(一)微生物活性消失法

此法是以一株对青霉素高度敏感的枯草芽胞杆菌的指示菌，如待检菌株产生β内酰胺酶，破坏了青霉素，则在划线两边有枯草芽胞菌生长，否则指示菌仍呈很大抑菌环。

(二)淀粉-碘测定法

β内酰胺酶破坏β内酰胺环，碘与被打开β内酰胺环结合，使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。

方法：用pH6.0磷酸缓冲液配制青霉素悬液6000μg/ml，取该液0.1ml置于微量稀释板凹孔中，挑选检测菌株数个菌落混悬于其中，摇动30min，静置室温中1h，加淀粉液2滴，再加碘液1滴，混合，立即观察颜色变化，阳性者当加入碘液后，首先立即出现蓝色、如在10min内消失蓝色，提示该菌产生β-内酰胺酶。

(三)酸测量法

青霉素被β-内酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降6.8以下，用酚红指示剂，由红(紫)色(原液：枸橼酸缓冲液pH8.5)→黄色(pH6.8以下)。

(四)头孢硝基噻吩显色反应

头孢硝基噻吩(Nitrocefin)的β-内酰胺环被β-内酰胺酶打开，基质由黄色变成红色。

液体方法：10mg头孢硝基噻吩溶解于lml的二甲基亚砜中，然后用0.1mol/LPBS(pH7.0)再稀释1：20，最后浓度为500μg/m1，溶液呈黄或淡橙色，保存4～10℃，可用几个星期。取该溶液0.05ml置放于微量稀释板凹孔中或小试管中，挑取被试菌落，制成浓厚悬液，与凹孔中基质液混和，室温10～30min，头孢硝基噻吩由黄变成红色为阳性，若显色不明显，观察可延长6h。

有报道纸片法用于流感嗜血杆菌和淋病奈瑟菌检测β-内酰胺酶的结果是准确的，但对于某些菌株产生少量而与菌细胞紧密结合的β-内酰胺酶，如腐生葡萄球菌等，用液体法检测更好。上述任何一种检测方法都应用质量控制。

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